酸解法提取林蛙骨中可溶性钙的研究论文
摘 要:林蛙骨含钙量很高,与人的骨骼钙磷比相当,且富含骨胶原蛋白,是补钙的极好钙源。基于此,用酸解法提取林蛙骨中可溶性钙,分析酸种类、混合酸比例及用量对溶出可溶性钙含量的影响,旨在为工业化生产高钙饮料、口服液产品提供科学依据。
关键词:林蛙骨; 可溶性钙; 酸解法
东北林蛙(Rana dybowskii)是东北地区优势药用资源之一,性味咸、凉,是中国东北地区独有的一种原始动物。林蛙骨是林蛙养殖与加工企业的废弃物,往往被废弃,造成资源的浪费,同时造成污染。然而蛙骨含钙量很高,钙磷比为2∶1,与人的骨骼钙磷比相当,而且富含骨胶原蛋白,是补钙的`极好钙源。使用蛙骨作为钙源,可使摄入的钙磷比适合人体吸收,同时又可增加骨胶原蛋白,强壮身体。但在林蛙骨钙高效提取方面的研究与应用至今未见报道。因此,通过提取林蛙骨钙,确定最优工艺参数,旨在寻找可以提高林蛙骨钙提取率、减少杂质并缩短提取时间的新方法,为工业化生产高钙饮料、口服液产品提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 材料 林蛙骨(由中韩动物科学研究院提供),柠檬酸(食品级),苹果酸(食品级)。
1.2 试剂和仪器
1.2.1 试剂 氢氧化钠,碳酸钙,三乙醇胺,钙羧酸,丙酮,乙二胺四乙酸二钠,硫化钠,均为分析纯。
1.2.2 仪器 高速离心机,磁力搅拌器,循环水式真空泵,电子天平。
1.3 试验方法
1.3.1 林蛙骨预处理 林蛙骨去除蛙肉、筋等杂质后,放置阴凉处晾干,中药粉碎机粉碎处理,过筛制成160目林蛙骨粉备用。
1.3.2 试验设计 称取林蛙骨粉,酸解后测定林蛙骨酸解液中可溶性钙的含量,钙含量的检测按照GB1239890进行,研究苹果酸、柠檬酸和不同混合酸比(柠檬酸与苹果酸的摩尔比)对林蛙骨可溶性钙溶出的影响。
1.4 数据处理 数据统计在Excel 2003中完成,数据分析采用DPS7.05分析软件。
2 结果与分析
2.1 提取酸种类对林蛙骨中溶出可溶性钙含量的影响 提取酸种类对林蛙骨中溶出可溶性钙含量的影响见图1。从图1中可以看出,混合酸的钙离子溶出量最高,达到5.67 mg/mL,高于柠檬酸15.10%,高于苹果酸9.48%。所以,该文采用柠檬酸和苹果酸的混合酸作为提取酸。
图1 提取酸种类对林蛙骨中溶出可溶性钙含量的影响
图左侧ml改为mL,下图同
2.2 混合酸比例对林蛙骨中溶出可溶性钙含量的影响 柠檬酸和苹果酸之间的配比不同,所得到的可溶性钙离子浓度也会不同,为了确定它们之间的最佳配比,对二者的比例进行试验研究。混合酸比例对林蛙骨溶出可溶性钙含量的影响见图2。由图2可以看出,柠檬酸与苹果酸比例的越大,林蛙骨溶出可溶性钙含量越高,混合酸的摩尔比为1.0∶1.5时最高,此时溶液中钙离子含量为11.95 mg/mL,当混合酸比例继续升高,林蛙骨溶出可溶性钙含量则呈下降趋势。因此,选摩尔比为1.0∶1.5为混合酸的合理配比。
图2 混合酸比例对林蛙骨中溶出可溶性钙含量的影响
图中下侧数据分别改为1.0∶0.5,1.0∶1.0,1.0∶1.5,1.0∶2.0,1.0∶2.5
2.3 混合酸用量对林蛙骨中溶出可溶性钙含量的影响 混合酸用量是酸发挥酸解作用的关键因素之一,在柠檬酸和苹果酸的酸性条件下,林蛙骨中胶原纤维和羟基磷灰石的紧密结合被破坏,钙离子迅速游离出来。从图3可以看出,林蛙骨溶出可溶性钙含量随着混合酸用量的增加而增加,在混合酸添加量为2~6 g时,钙离子含量迅速增加;当混合酸的添加量继续升高,钙离子含量仍是逐渐增长的,但增长速度趋于平缓,近于水平。这说明,一定酸浓度范围内随酸的添加量上升有利于酸解反应的进行,但酸添加量超过6∶10时,会导致酸与底料浓度的比例失调,影响酸解效果,反而增加试验成本。因此,选择混合酸的用量6 g,即骨∶酸=5∶3(质量比)为合适的混合酸用量。
图3 混合酸用量对林蛙骨中溶出可溶性钙含量的影响
3 结论
林蛙骨在苹果酸、柠檬酸和混合酸作用下,混合酸对林蛙骨中溶出可溶性钙含量影响最大,苹果酸次之,柠檬酸最小;柠檬酸与苹果酸比例越大,林蛙骨溶出可溶性钙含量越高,混合酸的摩尔比为1.0∶1.5时最高,当混合酸比例继续升高,林蛙骨溶出可溶性钙含量则呈下降趋势;一定酸浓度范围内随酸的添加量上升有利于酸解反应的进行,但酸添加量超过6∶10时,会导致酸与底料浓度的比例失调,影响酸解效果。
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